不同方式下气管内滴注脂多糖方法制作急性呼吸窘迫综合征大鼠模型

目的探讨内窥镜下辅助滴注脂多糖及气管暴露法滴注脂多糖诱导急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠动物模型的差异。 方法32只Sprague Dawley大鼠分为EC组（内窥镜下辅助气管插管滴注等渗NaCl溶液）、EL组（内窥镜下辅助气管插管滴注脂多糖）、IC组（气管暴露法滴注等渗NaCl溶液）、IL组（气管暴露法滴注脂多糖）,每组各8只。记录制作动物操作时间。滴注脂多糖24 h后采集动脉测定动脉血氧分压（PaO₂）及氧合指数,计算肺组织湿/干重比值（W/D）,检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中蛋白含量,血清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,并进行弥漫性肺泡损伤（DAD）评分。 结果EC组、IC组、EL组及IL组大鼠手术操作时间分别为（212 ± 24）、（296 ± 53）、（233 ± 44）、（321 ± 56）s,四组大鼠间比较,差异有统计学意义（F = 9.808,P < 0.001）,且与IC组和IL组比较,EC组、EL组制作动物模型的操作时间均明显缩短（P均< 0.05）。四组大鼠间PaO₂、氧合指数、肺W/D、BALF蛋白含量、血清TNF-α、IL-6及DAD评分比较,差异均有统计学意义（F= 124.752、123.920、73.775、65.922、48.342、419.548、655.623,P均< 0.001）。进一步两两比较发现,与EC组及IC组比较,EL组及IL组大鼠的PaO₂ [（104 ± 10）、（105 ± 9）、（54 ± 3）、（53 ± 4）mmHg]、氧合指数[（498 ± 48）、（502 ± 43）、（261 ± 17）、（255 ± 21）mmHg]均显著降低,肺W/D [（4.14 ± 0.16）、（4.36 ± 0.18）、（5.53 ± 0.31）、（5.58 ± 0.29）]、BALF蛋白含量[（0.39 ± 0.07）、（0.34 ± 0.05）、（2.19 ± 0.13）、（2.15 ± 0.11）g/L]、血清TNF-α [（177 ± 38）、（186 ± 51）、（414 ± 61）、（440 ± 74）ng/L]、IL-6 [（104 ± 11）、（113 ± 28）、（584 ± 42）、（603 ± 56）ng/L]及DAD评分[（0.90 ± 0.29）、（0.82 ± 0.38）、（11.65 ± 0.89）、（12.23 ± 0.97）分]均显著升高（P均< 0.05）。 结论采用内窥镜下辅助气管插管滴注脂多糖能简单、有效地建立大鼠ARDS模型。     

肺开放策略对体外循环后呼吸功能及TNF-α IL-8的影响

目的 研究肺开放策略(OLC)对体外循环(CPB)手术后呼吸功能及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)水平的影响.方法 选择24例心内直视手术患者,随机分成常规机械通气组(CMV)、早期肺开放组(EOL)、晚期肺开放组(LOL),EOL组在气管插管后实施肺开放策略,LOL组到达ICU后30 min实施肺开放策略:分别于术前、CPB后及到ICU后120、240及360 min记录各项呼吸指标:吸氧浓度、气道峰压、实际潮气量和呼气末气道正压(PEEP),计算动态肺顺应性.以酶联免疫吸附反应(ELISA)技术于术前、CPB后及到ICU后3、5、24和48 h测定TNF-α、IL-8水平.结果 CMV组及LOL组CPB后肺动态顺应性较术前明显下降(P＜0.01);EOL组肺动态顺应性CPB后未见下降;LOL组经实施肺开放后肺动态顺应性逐渐上升,但在到ICU 120 min前肺动态顺应性仍低于EOL组(P＜0.05);维持肺开放的最低PEEP LOL组高于EOL组(P＜0.01).CPB后各组TNF-α水平均较术前显著升高(P＜0.01),上升幅度EOL组低于LOL、CMV组,组间比较差异具有显著性(P＜0.01);CPB后EOL组TNF-α水平逐渐下降,LOL、CMV组TNF-α水平进一步上升,在到达ICU后3 h达峰值.IL-8水平在两肺开放组呈显著下降趋势,EOL组在到ICU后24h恢复术前水平,LOL组在到ICU后48h后恢复术前水平,但CMV组各时点均显著高于术前(P＜0.01).结论 OLC可减少CPB后炎性细胞因子的释放从而减轻CPB相关的肺损伤,早期实施OLC优于晚期实施OLC.     

糜酶抑制剂对肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的 观察糜酶抑制剂对博莱霉素（BLM）致大鼠肺纤维化模型干预作用及对糜酶、转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA表达的影响,并探讨糜酶参与肺纤维化的机制。方法 健康SD雌性大鼠60只随机分3组：正常对照组（生理盐水）、模型组（博莱霉素）、干预组（博莱霉素＋糜酶抑制剂）,每组20只。分别在第7、14、21、28天处死,每组检测5只大鼠,观察支气管肺组织病理改变,支气管肺泡灌洗液（BALF）白细胞计数及分类,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测肺组织糜酶和TGF β1mRNA表达的含量。结果 ① 干预组、模型组较对照组肺泡炎程度明显加重,但干预组和模型组相差不明显;② 干预组、模型组较对照组纤维化明显增高,干预组较模型组纤维化明显减轻;③ 干预组和模型组大鼠的BALF中白细胞总数、巨噬细胞、中性粒细胞及淋巴细胞构成与对照组差异有统计学意义（P＜0,01）,干预组的中性粒细胞在第7和14天比模型组减少（P＜0,01,P＜0,05）;④ 模型组和干预组肺组织中糜酶、TGF-β1的mRNA的表达持续增强,与对照组比较差异有统计学意义（P＜0,01）,干预组比模型组表达明显减少（P＜0,01）。结论 糜酶抑制剂能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,其主要机制是通过下调糜酶、TGF-β1的mRNA的表达发挥作用。     

驱动压对肺内源性急性呼吸窘迫综合征的影响

目的探讨不同驱动压力对脂多糖诱导的肺内源性急性呼吸窘迫综合征（ARDS）的治疗作用及其机制。 方法40只雄性Sprague-Dawley大鼠分为对照组、急性呼吸窘迫综合征模型组（ARDS组）、机械通气低驱动压组（L组）、机械通气一般驱动压组（M组）、机械通气高驱动压组（H组）,每组各8只。气管内滴注脂多糖6 mg/kg复制ARDS动物模型,模型复制成功后对L组、M组及H组实施相应的机械通气策略4 h。比较5组大鼠动脉血氧分压（PaO₂）、二氧化碳分压（PaCO₂）、肺组织湿/干重比、肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、血清中白细胞介素6（IL-6）的表达水平以及肺组织病理形态学变化情况。 结果5组大鼠PaO₂、PaCO₂、肺组织湿/干重比、BALF中蛋白含量、血清IL-6、PCⅢ表达水平、塌陷肺泡所占比例以及膨胀肺泡所占比例比较,差异均有统计学意义（F= 25.054、5.316、14.306、84.940、93.379、41.983、49.343、123.433,P均< 0.05）。进一步两两比较发现,L组和H组PaO₂、肺组织湿/干重比、BALF中蛋白含量、血清IL-6以及塌陷肺泡所占比例与ARDS组比较,差异均有统计学意义（P均< 0.05）,H组PaCO₂表达水平和膨胀肺泡所占比例与ARDS组比较,差异均有统计学意义（P均< 0.05）,L组PCIⅢ表达水平较ARDS组显著降低（P < 0.05）;H组PaO₂、血清IL-6、PCⅢ表达水平、塌陷肺泡所占比例以及膨胀肺泡所占比例与ARDS组比较,差异均有统计学意义（P均< 0.05）。 结论在小潮气量通气下,较低的驱动压力能够改善脂多糖诱导的肺内源性ARDS大鼠的气体交换,减轻肺水肿,降低炎症反应;当驱动压过高时可能引起肺过度膨胀,甚至诱发肺损伤的发生。     

磷酸肌醇3激酶-Rac-Nadrin通路在血小板肌动蛋白细胞骨架重构中的作用

目的 观察磷酸肌醇3激酶(PI3K)-Rac-Nadrin通路在血小板肌动蛋白(actin)细胞骨架重构和细胞形态改变中的作用.方法 选择健康成年志愿者50名,采集外周静脉血,提取洗涤血小板,取200μl经正常洗涤的血小板(3×1011/L),设为A组,另取200μl洗涤后的血小板(3×1011/L),用渥曼青霉素(100 nmol/L)预处理后15 min后,设为B组,将两组进行血小板聚集率的检测.提取经脂多糖(LPS)内毒素刺激聚集和铺展的两组血小板的总蛋白,进行比较,用鬼笔环肽(Phalloidin)和两组血小板的肌动蛋白丝(F-actin)特异性结合,采用共聚焦激光扫描显微镜分析两组血小板F-actin含量的变化.同时观察两组血小板内F-actin排列和分布的改变,以及血小板形态的变化.结果 血小板聚集仪检测两组血小板聚集率,结果显示,在渥曼青霉素作用下血小板聚集率明显降低(P＜0.05),显示渥曼青霉素能够抑制血小板聚集.同时,经渥曼青霉素作用的A组血小板,其F-actin平均荧光强度明显降低,为B组的(58.8±6.9)％,差异有统计学意义(P＜0.05).和B组比较,A组血小板骨架发生解聚,应力纤维的排列和分布以及血小板形态明显改变.结论 PI3 K-Rac-Nadrin通路在血小板F-actin细胞骨架重构中发挥重要作用.     

醒脑静联合纳洛酮治疗重症中暑效果观察

目的：探讨醒脑静联合纳洛酮治疗重症中暑患者的退热促醒效果。方法：选取重症中暑患者56例,随机分为醒脑静联合纳洛酮组（观察组）和常规治疗组（对照组）,每组各28例。比较两种治疗方法对患者体温下降速度和意识障碍减轻程度的疗效。结果：（1）两组患者治疗前意识障碍分级及体温分级差异无统计学意义（P＞0.05）;（2）体温下降3个等级中,其中1h内T〈38.5℃为显效,3h内T〈38.5℃为有效,显效和有效合并计算有效率,体温下降不明显的为无效。观察组降温有效率明显优于对照组,两组比较差异有统计学意义（χ2=4.909,P＜0.05）。（3）两组患者意识障碍减轻程度比较,观察组意识障碍减轻有效率优于对照组,差异有统计学意义（χ2=4.383,P＜0.05）。结论：醒脑静联合纳洛酮治疗重症中暑患者可以快速降低患者体温、改善意识障碍。     

我国危重症病人营养支持现状调查分析

目的: 在全国范围内调查机械通气危重症病人EN和PN支持现状和存在问题,为进一步改进危重症病人营养支持策略提供临床依据. 方法: 国内多中心、前瞻性和观察性研究.本次调查历时100 d,共有15个省市、25所医院、26个ICU共443例病人参与.依据加拿大Heyland研究小组发起的2008年全球ICU危重症病人营养支持应用现状调查的内容,对所得结果进行独立统计学分析. 结果: 19个ICU(73%)对病人EN期间床头抬高、胃残余量监测、中止喂养或转为小肠喂养指征等具体实施细则有明确的规定.25个ICU(96.2%)有计划应用胰岛素控制病人血糖.早期(入住ICU 48 h内)TEN病人仅占38.8%(172/443);EN+PN占20.5%(91/443);因不耐受EN而中途中止的病人共10例(5.8%).本次调查共观察4 303 d.2 003 d(46.5%)接受TEN,869 d接受EN+PN(20.2%).72 h内达到80%预计能量病人共82例(47.7%),与未达预计能量病人相比,机械通气时间、入住ICU时间、住院时间和病死率均无显著性差异.接受PN病人共230例,经PN液中添加Gln者占38.3%(88/230);机械通气时间(P=0.001)和入住ICU时间(P=0.005)明显少于未添加Gln组. 结论: 危重症病人营养支持已得到广泛认可和重视,并通过具体的实施方案规范临床行为.EN仍存在喂养不足和累积能量摄入的缺乏.PN液中添加Gln能缩短病人机械通气和入住ICU的时间.     

糜酶抑制剂对大鼠肺纤维化的干预作用及对血管紧张肽Ⅱ及其受体的影响

目的:观察糜酶抑制剂(Chy-I)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型的干预作用和对血管紧张肽Ⅱ及其受体的影响,探讨糜酶参与肺纤维化的机制。方法:健康SD大鼠60只随机分3组:正常对照组(生理盐水),模型组(博莱霉素),干预组(博莱霉素 糜酶抑制剂)。分别在第7,14,21,28天,每组HE染色5只大鼠,观察支气管肺组织病理改变,免疫组化观察肺组织中血管紧张肽Ⅱ及其受体的表达。结果:(1)肺泡炎程度评价:干预组和模型组与对照组间比较,差异有统计学意义,但干预组和模型组间差异无统计学意义。(2)肺纤维化程度评价:干预组和模型组与对照组间差异有统计学意义,且干预组和模型组之间比较,差异亦有统计学意义。(3)血管紧张肽Ⅱ及其受体的表达分析:模型组肺间质中血管紧张肽Ⅱ及其受体表达均持续增强,干预组均明显减少。结论:糜酶抑制剂能减轻博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能是通过下调血管紧张肽Ⅱ及其1型受体(AT1)的表达而起作用。     

氢化可的松对兔脓毒症早期心肌功能的影响

目的 探讨不同剂量氢化可的松(HC)对脓毒症早期心肌功能的影响.方法 将24只中国白兔随机均分为模型组、小剂量HC组(10 mg/kg)、大剂量HC组(100 mg/kg)3组.采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备兔脓毒症模型.于制模前、给药前(CLP后1 h)以及给药后2、4和6 h监测左心室功能变化;取动脉血,检测血清中肌钙蛋白I(cTnI)和一氧化氮(NO)含量;用免疫组化法观察心肌诱生型一氧化氮合酶(iNOS)表达.结果 给药前各组动物左室内压上升/下降最大速率(±dp/dt max)均较制模前明显下降,NO明显升高(P均<0.05).给药6 h小剂量HC组±dp/dt max水平均明显高于模型组和大剂量HC组,cTnI水平明显低于模型组和大剂量HC组(P均<0.05);但两个剂量HC组NO水平均明显低于模型组(P均<0.05),心肌iNOS阳性细胞率亦较模型组低[模型组:(81.8±15.8)%,小剂量HC组:(56.7±21.2)%,大剂量HC组:(54.6±16.1)%,P均<0.05].结论 脓毒症状态下心肌功能可发生明显损伤,早期应用小剂量HC对心肌功能有一定的保护作用.